人白色念珠菌（C.albicans）ELISA試劑盒如何正確使用呢？

人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒試劑盒性能：<o:p></o:p>   1. 樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。<o:p></o:p>   2. 批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%<o:p></o:p>   人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒試劑盒檢測(cè)范圍：<o:p></o:p>   0.2IU/L - 6IU/L<o:p></o:p>   人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒樣本處理及要求：<o:p></o:p>   1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。<o:p></o:p>   2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。<o:p></o:p>   3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。<o:p></o:p>   4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。<o:p></o:p> 通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。<o:p></o:p>   5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。<o:p></o:p>   6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.<o:p></o:p>   7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。<o:p></o:p>   人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒試劑盒操作步驟：<o:p></o:p>   1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；<o:p></o:p> 混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。<o:p></o:p> （稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。<o:p></o:p>   2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。<o:p></o:p>   3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。<o:p></o:p>   4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。<o:p></o:p>   5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。<o:p></o:p>   6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。<o:p></o:p>   7. 溫育：操作同3。<o:p></o:p>   8. 洗滌：操作同5。<o:p></o:p>   9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.<o:p></o:p>   10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。<o:p></o:p>   11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。<o:p></o:p>   人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒試劑盒注意事項(xiàng)：<o:p></o:p>   1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。<o:p></o:p>   2． 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。<o:p></o:p>   3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。<o:p></o:p>   4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，zui好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。<o:p></o:p>   5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。<o:p></o:p>   6． 底物請(qǐng)避光保存。<o:p></o:p>   7． 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).<o:p></o:p>   8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。<o:p></o:p>   9． 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。<o:p></o:p>   10. 如與英文說(shuō)明書有異，以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。<o:p></o:p>   上海酶聯(lián)始終以滿足用戶需求為宗旨，誠(chéng)心聆聽用戶的需要與批評(píng)，作為不斷改進(jìn)的動(dòng)力，為用戶提供及時(shí)周到的銷售與技術(shù)服務(wù)。<o:p></o:p> 公司堅(jiān)持從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案、試劑選購(gòu)、制造、裝配、檢驗(yàn)、包裝、運(yùn)輸、直到售后服務(wù)做好質(zhì)量保證，就是要讓所有新老客戶 “付有所值”，以合理的價(jià)位得到的產(chǎn)品，這是對(duì)您選擇上海酶聯(lián)真誠(chéng)的回報(bào)。<o:p></o:p> 上海酶聯(lián)真誠(chéng)的希望與國(guó)內(nèi)外同仁攜手合作，為推動(dòng)我國(guó)科研事業(yè)迅猛發(fā)展做出貢獻(xiàn)。<o:p></o:p>

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